（一）主要研究内容

1 安全性研究

1.1理气散结浸膏对大鼠的急性毒性实验研究

大鼠在24h内分两次被灌胃给予理气散结浸膏（两次合计的最大给予容积为20 mL/kg，最大药物浓度为2.4365g原生药材/mL，最大给药剂量为48.73 g原生药材/kg），连续观察14天，结果表明：

（1）死亡情况：理气散结浸膏组20只大鼠全部存活，未见死亡。

（2）一般情况及中毒症状：灌胃给予理气散结浸膏后，0.5~1h内大鼠普遍出现精神萎靡的症状，且鼻尖微微发红，并在接下来0.5h内恢复正常，可能与动物被抓握和被灌以较大体积的药液有关。在2-14天内，各大鼠均未出现行动能力丧失、腹泻和精神萎靡等不良反应，其被毛、肤色、鼻、眼、口腔分泌物均未见异常；心血管系统、呼吸系统、运动功能、反射及痛觉未见异常。

（3）尸检结果：第14天时解剖所有大鼠，内部脏器未见肉眼可见异常。

（4）体重和饲料消耗量：对大鼠体重的自然增长没有影响。给予次日大鼠的饲料消耗量降低，但在之后的14天内大鼠的饲料消耗量没有明显变化。

（5）血常规：19项血常规指标均无明显变化。

（6）血液生化学：第14天时，动物血清中谷丙转氨酶（ALT）活性降低、谷草转氨酶（AST）活性增强和葡萄糖（GLU）含量降低，但均在正常范围内；其余各项血液生化学指标均无明显变化。

表1-1 大鼠的血常规测定结果()

指标	名称	红细胞数	血红蛋白含量	红细胞比积	平均红细胞体积	平均血红蛋白含量	平均血红蛋白浓度
		×1012/L	g/L	L/L	Fl	Pg	g/L
空白对照组	n=20	5.04±0.28	123.65±4.28	0.24±0.01	48.03±0.86	23.25±0.90	509.55±14.08
理气散结浸膏组	n=19	5.03±0.33	124.21±4.18	0.24±0.01	48.27±1.50	23.47±1.27	511.58±22.29

 

表1-2 大鼠的血常规测定结果()

 

指标	名称	红细胞宽度变异系数	红细胞宽度标准差	血小板数	平均血小板体积	白细胞数	淋巴细胞绝对值	中间细胞绝对值
		%	fL	109/L	fL	109/L	109/L	109/L
空白对照组	n=20	17.75±0.35	49.62±12.10	335.45±108.00	7.34±0.10	12.44±2.09	7.98±0.96	0.86±0.15
理气散结浸膏组	n=19	17.98±0.46	50.55±13.72	322.95±130.56	7.36±0.14	11.96±2.07	7.59±1.77	0.87±0.19

表1-3 大鼠的血常规测定结果()

指标	名称	粒细胞绝对值	淋巴细胞百分比	中间细胞百分比	粒细胞百分比	血小板比积	血小板分布宽度
		109/L	%	%	%	L/L	%
空白对照组	n=20	3.52±1.42	64.94±7.65	7.02±0.54	29.55±11.06	0.25±0.08	19.07±1.51
理气散结浸膏组	n=19	3.50±1.02	63.11±7.88	7.22±0.92	29.67±8.63	0.24±0.10	19.94±2.00

表2-1大鼠的血液生化学指标测定结果()

指标	名称	谷丙转氨酶	谷草转氨酶	碱性磷酸酶	谷氨酰转移酶	总红胆素	总蛋白	白蛋白
		u/L	u/L	u/L	u/L	umol/L	g/L	g/L
空白对照组	n=20	56.50±8.29	132.45±25.76	170.30±54.81	11.50±2.86	6.69±2.99	60.63±8.53	24.44±1.33
理气散结浸膏组	n=19	44.84±7.41**	149.21±22.55*	139.89±49.41	10.37±3.32	7.62±3.34	62.75±7.94	24.01±1.60

 

表2-2大鼠的血液生化学指标测定结果()

指标	名称	球蛋白	白球比	尿素氮	肌酐	胆固醇	甘油三酯	肌酸激酶	葡萄糖
		g/L	——	mmol/L	umol/L	mmol/L	mmol/L	u/L	mmol/L
空白对照组	n=20	36.19±8.76	0.72±0.21	5.10±2.16	83.40±27.18	1.26±0.33	0.64±0.24	145.75±49.62	8.75±2.73
理气散结浸膏组	n=19	38.74±8.27	0.65±0.15	6.39±1.93	84.11±18.35	1.28±0.29	0.80±0.41	178.58±76.06	7.18±1.47

 

注：与空白对照组比较，*表示P<0.05，**表示P<0.01。

实验结论：大鼠经口给予理气散结浸膏（最大给药剂量为48.73 g原生药材/kg，为临床日用剂量0.3914 g原生药材/kg/d的124倍）后，未见死亡、中毒症状、脏器、体重等的异常变化，但饲料消耗量、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和葡萄糖（GLU）等指标有明显变化。

结果提示：理气散结浸膏对大鼠经口的最大给药量为48.73 g原生药材/kg，虽不导致动物死亡，亦未见肉眼可见的毒性反应，但是需要注意监测饲料消耗量和血液生化学指标；本结果可为长期毒性试验和主要药效学研究中的剂量设置提供依据。

1.3理气散结浸膏对大鼠的长期毒性实验研究

将160只大鼠随机分为对照组（生理盐水，15 mL/kg）、理气散结浸膏剂量组（7.828、15.656、31.312g生药/kg）。给药组灌胃给予相应药物，对照组灌胃给予生理盐水，每天灌胃给药1次，每周6天，连续120天，停药后30天作为恢复期。观察各个时期动物的一般状况、体重和饲料消耗量。给药第61天、给药结束及恢复期结束后各组分别处死10、20、10只大鼠并系统尸解，检测大鼠血液学、血液生化学、脏器系数和组织病理变化。

结果：给药第61-120天时理气散结浸膏高剂量组大鼠脱毛和竖毛；理气散结浸膏低、中剂量组大鼠的体重增长速度增加，而高剂量组大鼠的体重增长速度降低；低剂量组大鼠的饲料消耗量增加，中、高剂量组大鼠的饲料消耗量降低；停药后基本恢复；恢复期结束后肝脏、肾脏、胸腺系数均恢复，而中剂量组大鼠的子宫系数降低（P<0.05），高剂量组大鼠的脾脏系数明显升高（P<0.05）；恢复期结束后血液学和血液生化学基本恢复，而低剂量组大鼠血液中的红细胞数RBC、红细胞比积HCT、红细胞宽度标准差RDW-SD、白蛋白ALB、白球比A/G和钾离子K+降低（P<0.05或P<0.01），中剂量组大鼠血液中的中间细胞绝对值Mid#升高（P<0.05），平均血红蛋白浓度MCHC和K+降低（P<0.05），而高剂量组大鼠血液中的白细胞数WBC、淋巴细胞绝对值LY#、Mid#、中间细胞百分比Mid%和凝血酶原时间PT升高（P<0.05或P<0.01），MCHC、粒细胞百分比GR%、ALB、碱性磷酸酶ALP和K+降低（P<0.05或P<0.01）。大鼠系统尸解和组织病理学无异常。

结论：大鼠长期灌胃给予理气散结浸膏会产生毒性反应，但低剂量毒性反应较少、较轻且能恢复，可作为安全剂量外推到临床使用。